Thuật ngữ "kính hiển vi" có nguồn gốc từ tiếng Hy Lạp. Trong bản dịch, nó có nghĩa là nghiên cứu các đối tượng bằng cách sử dụng các công cụ chính xác cao. Gần đây, kính hiển vi điện tử và huỳnh quang ngày càng trở nên phổ biến.
Độ phân giải
Theo quy tắc, họ hiểu khoảng cách tối thiểu mà tại đó các đối tượng có thể phân biệt rõ ràng có thể được định vị. Mức độ thâm nhập vào thế giới vi mô, khả năng xem xét kích thước của phần tử đang nghiên cứu sẽ phụ thuộc vào độ phân giải của thiết bị. Ở độ phóng đại cao, ranh giới của các đối tượng có thể hợp nhất. Theo đó, có một số giới hạn nhất định mà việc ước lượng các phần tử là vô nghĩa.
Phương pháp hiển vi phát quang: cơ chế
Khi năng lượng được hấp thụ bởi một chất được chuyển thành bức xạ nhìn thấy được, thì hiện tượng phát sáng sẽ xảy ra. Nó được gọi là sự phát quang. Hiện tượng này là do một số chất, dưới tác dụng của ánh sáng, bắt đầu phát ra các tia có bước sóng khác (thường là lớn). Ngoài ra, một số đối tượng, dưới ánh sáng bình thường, có mộtmàu sắc, dưới tác động của tia cực tím thay đổi màu sắc của chúng.
Cụ thể
Một vật không thể nhìn thấy dưới tia cực tím có thể phát ra ánh sáng nếu nó được xử lý bằng một chất đặc biệt. Trong đó, các phần tử phát sáng với nhiều màu sắc khác nhau trong bóng tối. Độ mạnh của bức xạ là khác nhau, nhưng, theo quy luật, nó nhỏ. Về vấn đề này, kính hiển vi huỳnh quang có hiệu quả trong phòng tối. Khi sử dụng loại nghiên cứu này, đối tượng được nhìn dưới ánh sáng mà bản thân nó phát ra. Thành phần hóa học của mô, tế bào sẽ ảnh hưởng đến chất lượng nghiên cứu. Kính hiển vi huỳnh quang được coi là một nghiên cứu mô hóa học ở một mức độ nhất định.
Phân loại
Kính hiển vi huỳnh quang có thể là chính hoặc phụ. Trong trường hợp thứ hai, vật thể được xử lý bằng các hợp chất đặc biệt tạo ra ánh sáng. Kính hiển vi huỳnh quang sơ cấp dựa trên khả năng phát ra ánh sáng của chính nguyên tố.
Thiết bị
Kính hiển vi huỳnh quang được thực hiện bằng nhiều thiết bị khác nhau. Yếu tố chính của họ là đèn chiếu sáng. Nó được trang bị một đèn UV. Ngoài ra, các thiết bị sử dụng một bộ bộ lọc. Trong một số thiết bị, có khá nhiều cấu hình khác nhau. Tùy thuộc vào màu sắc nào được sử dụng để kích thích sự phát quang - tia cực tím hoặc xanh lam, một bộ lọc thích hợp được đặt giữa nguồn sáng và vật thể được nghiên cứu. Vì sự phát sáng của một phần tử vi mô yếu hơn về mặt năng lượng so với ánh sáng kích thích, nó sẽ chỉ bị bắt trong một điều kiện. Các tia thừa từ nguồn phải được cắt bỏ bằng bộ lọc màu vàng xanh. Nó nằm trên thị kính của thiết bị. Hiệu ứng rõ rệt nhất của sự phát quang sẽ là khi bộ lọc cắt hoàn toàn các tia phát ra từ nguồn sáng.
Việc lắp đặt ánh sáng khả kiến bao gồm những gì? Nó chứa một nguồn sáng và một kính hiển vi sinh học. Một bộ lọc màu xanh tím được đặt giữa gương của thiết bị và đèn. Nó có thể là FS-1, UFS-3, v.v. Bộ lọc màu vàng được đặt trên thị kính của kính hiển vi. Với sự giúp đỡ của họ, ánh sáng xanh tím rơi vào vật thể. Nó kích thích sự phát quang. Nhưng ánh sáng này có thể cản trở việc nhìn thấy ánh sáng. Do đó, trên đường đến mắt, nó bị cắt bởi một bộ lọc màu vàng. Ánh sáng được thiết lập theo phương pháp Koehler, với một ngoại lệ. Màng ngăn ngưng tụ phải được mở hoàn toàn. Khi kiểm tra, điều quan trọng là sử dụng dầu ngâm không huỳnh quang. Để giảm độ sáng của chính nó, nitrobenzene được thêm vào nó (2-10 giọt / 1 g).
Kính hiển vi phát quang: ứng dụng trong vi sinh
Lợi ích của loại hình nghiên cứu này là:
- Khả năng chụp ảnh màu.
- Các phần tử tự phát sáng có độ tương phản cao trên nền đen.
- Phát hiện và định vị một số loại vi-rút và vi khuẩn.
- Khả năng nghiên cứu trong suốt và mờ đụcsinh vật sống.
- Nghiên cứu các quá trình sống trong động lực học của chúng.
Cũng cần phải nói rằng kính hiển vi phát quang góp phần vào việc phát triển các phương pháp tốt nhất của mô hình và hóa tế bào, chẩn đoán nhanh.
