Bài viết này sẽ được dành cho các hiện tượng của phản ứng kết tủa. Ở đây chúng ta sẽ xem xét các đặc điểm về công thức của hiện tượng này, hiện tượng lan tỏa, đặc điểm chung, vai trò trong đời sống con người và nhiều hơn thế nữa.
Giới thiệu về hiện tượng
Kết tủa là một hiện tượng của một loại huyết thanh học, trong đó các kháng nguyên hòa tan tương tác với các kháng thể và kết quả là quan sát thấy kết tủa - kết tủa.
Đặc điểm chung của phản ứng kết tủa là một dạng phối hợp ảnh hưởng của kháng nguyên và kháng thể. Các loại tương tác này giúp xác định sự hiện diện của các kháng nguyên chưa biết trong chất thử bằng cách thêm các kháng thể và kháng nguyên đã biết. Quá trình kết tủa mà không có sự hiện diện của muối sẽ diễn ra tồi tệ hơn và mức tối ưu tốt nhất nằm trong khoảng 7,0-7,4 pH.
Các thành phần của phản ứng
Có ba yếu tố chính trong số các thành phần của phản ứng tạo kết tủa:
- Kháng nguyên có bản chất phân tử. Nó ở trạng thái loại tốt, nói cách khác, nóhòa tan. Ngoài ra, một loại kháng nguyên như vậy được gọi là kết tủa, là một chất chiết xuất từ chất ly giải hoặc mô, v.v. Kết tủa có sự khác biệt đặc trưng với một chất gây ngưng kết, nằm ở kích thước của các phần tử mà nó bao gồm. Agglutinogen có kích thước tế bào vốn có, và các chất kết tủa tương xứng với kích thước của phân tử. Dung dịch kháng nguyên có đặc điểm là trong suốt.
- Một kháng thể được tìm thấy trong huyết thanh máu người, cũng như trong huyết thanh chẩn đoán miễn dịch, có chứa các kháng thể đã được nghiên cứu.
- Chất điện phân là dung dịch natri clorua đẳng trương.
Sản xuất precipitogen
Việc thiết lập phản ứng tạo kết tủa là không thể nếu không có kết tủa, được tạo ra bằng cách nghiền nguyên liệu và chiết xuất các kháng nguyên protein từ chúng. Quá trình chiết xuất xảy ra bằng cách đun sôi hoặc các phương pháp khác.
Lysates, cũng như các chất chiết xuất từ mô và cơ quan, huyết thanh, các loại dịch lọc khác nhau dựa trên việc nuôi cấy vi sinh vật, cũng như chiết xuất muối của vi sinh vật và các chất tự phân giải, là một điểm nổi bật ví dụ về chất kết tủa.
Thiết lập trong mưa
Bây giờ chúng ta hãy xem xét phương pháp thiết lập phản ứng tạo kết tủa.
Phản ứng tạo kết tủa vòng được thực hiện trong các ống nghiệm được chuẩn bị đặc biệt. Huyết thanh được đưa vào khoang của đĩa, đổ huyết thanh lên thành với sự trợ giúp của vòi pipet. Tiếp theo, một lượng thích hợp của chất kết tủa được xếp lớp cẩn thận lên trên, và sau đó ống được đưa đến vị trí thẳng đứng từ một vị trí nằm ngang. Thiết lập và tính đến phản ứng kết tủa là một hoạt động rất tỉ mỉ. Kết quả được ghi nhận sau khi xuất hiện vòng trắng ở ranh giới giữa kháng nguyên và kháng thể. Nếu các phần tử phản ứng của phản ứng tương ứng với nhau, thì chúng liên kết, nhưng điều này trở nên đáng chú ý sau một thời gian dài tương tác của chúng.
Phản ứng tạo kết tủa cũng được thực hiện trong đĩa Petri hoặc trên thủy tinh trượt, nơi gel thạch được chuyển, áp dụng nó trong một lớp nhỏ. Sau khi nó đông cứng trong gel, một số lượng nhỏ giếng được cắt ra để đặt các kháng nguyên và kháng thể vào đó. Có hai cách để thực hiện hành động này: phương pháp khuếch tán miễn dịch xuyên tâm và truyền miễn dịch kép.
Thông tin chung
Cơ chế của công việc tạo kết tủa tương tự như thiết bị ngưng kết. Dưới ảnh hưởng của huyết thanh loại miễn dịch, kháng nguyên, đã tham gia vào phản ứng, làm giảm mức độ phân tán của nó. Một điều kiện quan trọng là tính trong suốt của cả huyết thanh và kháng nguyên.
Bạn có thể cải thiện việc đăng ký phản ứng nếu bạn chồng kháng nguyên lên kháng thể. Kết quả là có thể quan sát thấy sự xuất hiện của kết tủa ở dạng vòng. Hiện tượng này được gọi là kết tủa vòng và được thực hiện trong các ống đặc biệt có đường kính từ 2,5 đến 3,5 mm. Một trong những ví dụ phổ biến nhất của phản ứng kết tủa là chẩn đoán bệnh than.
Lượng mưa giúp xác định mức độ độc tố của môi trường nuôi cấy bạch hầu trong thạch.
Trong quá trình phản ứng đang được xem xétsự kết tủa của phức hợp kháng nguyên và kháng thể xảy ra. Kết tủa là một hiện tượng miễn dịch cho phép bạn xác định lượng kháng thể trong huyết thanh của người bệnh hoặc động vật được tiêm phòng.
Hệ quả chuẩn độ
Điều quan trọng cần biết là dữ liệu thu được bằng cách chuẩn độ của phương pháp trên là không thể định lượng được. Để tạo và phân tích đánh giá định lượng số lượng kháng thể chứa trong đó, một kỹ thuật phản ứng đặc biệt đã được phát triển bởi M. Heidelberger và E. Kabat, dựa trên việc tìm kiếm và xác định vùng tương đương. Trộn số lượng kháng nguyên theo tuổi với một thể tích kháng huyết thanh không đổi dẫn đến tăng kết tủa ban đầu tạo thành, sau đó lại giảm do tăng khả năng hòa tan phức hợp kháng nguyên. Bằng cách xác định lượng kháng thể trong chất nổi chứa trong mỗi ống, bạn có thể thấy rằng một số đĩa nhất định có kháng thể sẽ bị thiếu chất lỏng. Ở đây so với các ống nghiệm khác sẽ tạo thành kết tủa lớn nhất. Do điều này và trừ đi lượng kết tủa protein kháng nguyên khỏi tổng giá trị của các protein, có thể thu được giá trị chính xác của các kháng thể có trong thể tích của huyết thanh cụ thể đang được nghiên cứu. Hơn nữa, lượng phân tử protein của kết tủa được xác định bằng lượng nitơ hoặc sử dụng phương pháp so màu.
Đánh giá các giá trị
Việc ước tính các giá trị kết tủa trong phương pháp chẩn đoán phải tính đến khả năng có mặt trong huyết thanh miễn dịch của một kháng thể không có đặc tính của tủaitin, từ đó kết tủa có thể không có hình thành sau khi phản ứng với kháng nguyên. Danh sách các phân tử như vậy bao gồm các kháng thể không hoàn chỉnh và một số loài từ nhóm gamma-A globulin.
Phản ứng tạo kết tủa trong điều kiện phòng thí nghiệm được ứng dụng trong nhiều dạng biến đổi khác nhau. Ví dụ, phản ứng kết tủa nhiệt được sử dụng để phát hiện các kháng nguyên vi khuẩn gây ngộ độc thịt, bệnh than, v.v., không bị biến tính nhiệt. Không giống như kết tủa vòng, loại phản ứng này sử dụng dịch lọc của vật liệu được đề cập ở trạng thái đun sôi. Trong những trường hợp như vậy, một người sử dụng phương pháp kết tủa trong thạch và cũng sử dụng điện di miễn dịch.
Mưa khuếch tán
Trong lĩnh vực nghiên cứu này, có khái niệm về phản ứng kết tủa khuếch tán (RPD). Nó dựa trên khả năng khuếch tán trong gel của các kháng thể và kháng nguyên hòa tan. Sự khuếch tán là khả năng phân tử của một chất nào đó thâm nhập vào phân tử của chất khác, nguyên nhân là do chuyển động nhiệt.
Gel là một hệ phân tán trong đó pha lỏng được phân bố đồng đều trong pha rắn. Thông thường, gel thạch được sử dụng cho phản ứng như vậy.
Sau khi đưa ra các thông số, trongtrong điều kiện mà các phân tử có thể khuếch tán với nhau, sự gặp gỡ của chúng sẽ kèm theo sự hình thành phức hợp kháng nguyên + kháng thể. Một khối u như vậy có thể khuếch tán, nằm trong bản thân gel, và nó sẽ kết tủa, có dạng một dải có thể được phát hiện bằng mắt thường. Nếu kháng nguyên và kháng thể là tương đồng thì không có dải nào được hình thành.
Tạo điều kiện cho quá trình khuếch tán sẽ diễn ra khi ở trong lớp thạch liên quan đến việc đổ các thành phần, nhưng tổng số giếng và vị trí tương đối của chúng được xác định bởi loại nhiệm vụ được yêu cầu quyết định. RPD cung cấp cho một người khả năng phát hiện và xác định các vi rút chưa được phân lập bằng cách thử nghiệm sử dụng huyết thanh kháng thể đã biết.
Đơn
Lượng mưa không chỉ được sử dụng rộng rãi trong chẩn đoán bệnh tật mà còn được ứng dụng trong khám nghiệm pháp y. Rất khó để hình dung một phân tích trong đó có thể xác định loài máu, một phần của cơ quan hoặc mô được tìm thấy trên vũ khí tội phạm mà không sử dụng phản ứng kết tủa. Trong quá trình này, huyết thanh kết tủa được sử dụng, thu được bằng cách tiêm chủng cho các loài động vật và chim khác nhau. Điều quan trọng là nồng độ huyết thanh không nhỏ hơn 1: 10000, và nó cũng phải có đủ độ đặc hiệu. Từ vết máu được phát hiện hoặc lớp vỏ của nó, một chất chiết xuất được tạo ra để làm vật lý. giải pháp, sẽ được tiếp xúc vớikết tủa huyết thanh. Theo phản ứng này, có thể thiết lập các loại protein mô và cơ quan của cả người và động vật. Việc thu được dịch chiết có vẩn đục buộc người ta phải dùng đến kết tủa trên thạch.
Kết luận
Phân tích thông tin đã đọc, chúng tôi có thể kết luận rằng phản ứng kết tủa là cực kỳ quan trọng đối với một người, vì chúng cho phép chẩn đoán các kháng nguyên khác nhau bằng cách sử dụng kháng thể, hiện tượng này cũng được sử dụng rộng rãi trong kiểm tra pháp y và cho phép bạn xác định loại máu, mô hoặc cơ quan liên quan đến một đối tượng cụ thể. Có một số loại và phương pháp kết tủa, được sử dụng phù hợp với nhu cầu mới nổi của vấn đề đang được giải quyết.
