Nghiên cứu về vi khuẩn đòi hỏi công việc tỉ mỉ với nhiều thiết bị và dụng cụ. Để vi sinh vật nhân lên nhanh nhất có thể trong điều kiện phòng thí nghiệm và có thể duy trì hoạt động sống bình thường, các môi trường dinh dưỡng đặc biệt được sử dụng. Thành phần và điều kiện lý sinh của chúng phù hợp cho sự phát triển tích cực của môi trường nuôi cấy vi khuẩn.
Giá thể dinh dưỡng. Vi sinh và các ứng dụng khác
Các khuẩn lạc vi khuẩn được nuôi trong phòng thí nghiệm trên các đĩa Petri chứa đầy chất lỏng như thạch hoặc bán lỏng. Đây là các môi trường dinh dưỡng, có thành phần và đặc tính gần giống với môi trường tự nhiên nhất có thể để cây trồng phát triển chất lượng cao.
Môi trường như vậy được sử dụng trong nghiên cứu vi sinh vật và trong các phòng thí nghiệm chẩn đoán y tế. Phương pháp thứ hai thường hoạt động với các vết bẩn của vi khuẩn gây bệnh hoặc cơ hội, vị trí có hệ thống của vi khuẩn này được xác định trực tiếp tại cơ sở.
Tự nhiên và tổng hợpThứ 4
Quy tắc cơ bản để làm việc với vi khuẩn là lựa chọn đúng môi trường dinh dưỡng. Nó phải đáp ứng nhiều tiêu chí, bao gồm hàm lượng của các nguyên tố vi mô và vĩ mô, các enzym, một giá trị không đổi của độ axit, áp suất thẩm thấu và thậm chí cả tỷ lệ phần trăm oxy trong không khí.
Phương tiện dinh dưỡng được phân thành hai nhóm lớn:
- Môi trường tự nhiên. Hỗn hợp như vậy được chuẩn bị từ các thành phần tự nhiên. Đó có thể là nước sông, các bộ phận của thực vật, phân, rau, mô thực vật và động vật, nấm men, vv Những môi trường như vậy được đặc trưng bởi hàm lượng cao các chất hóa học tự nhiên, sự đa dạng của chúng thúc đẩy sự phát triển của vi khuẩn. Bất chấp những ưu điểm rõ ràng này, môi trường tự nhiên không cho phép nghiên cứu chuyên biệt với các chủng vi khuẩn cụ thể.
- Phương tiện tổng hợp. Chúng khác nhau ở chỗ thành phần hóa học của chúng được biết theo tỷ lệ chính xác của tất cả các thành phần. Các môi trường như vậy được chuẩn bị cho một môi trường nuôi cấy vi khuẩn cụ thể, quá trình trao đổi chất của chúng được nhà nghiên cứu biết trước. Trên thực tế, vì lý do này, người ta có thể chuẩn bị một môi trường tổng hợp như vậy cho sự phát triển của vi sinh vật. Chúng được sử dụng để phân tích hoạt động sống của vi khuẩn. Ví dụ, bạn có thể tìm hiểu xem chúng thải ra môi trường những chất gì và lượng bao nhiêu. Các vi sinh vật cũng sẽ phát triển trong môi trường tự nhiên, nhưng không thể theo dõi bất kỳ thay đổi số lượng nào trong thành phần do không biết tỷ lệ ban đầu của các chất.
Khác biệt-môi trường chẩn đoán
Để xử lý vi khuẩn, không chỉ có thể sử dụng môi trường dinh dưỡng thông thường. Vi sinh vật học là một ngành khoa học rộng lớn, và do đó, khi tiến hành một nghiên cứu, đôi khi cần phải lựa chọn vi sinh vật vì một lý do nào đó. Việc sử dụng các phương tiện chẩn đoán phân biệt trong phòng thí nghiệm giúp có thể chọn các khuẩn lạc vi khuẩn mong muốn trên đĩa Petri theo dấu hiệu sinh hóa về hoạt động sống của chúng.
Thành phần của các môi trường như vậy luôn bao gồm các thành phần sau:
1. Chất dinh dưỡng cho sự phát triển của tế bào.
2. Chất nền (chất) phân tích.
3. Một chất chỉ thị sẽ cho màu đặc trưng khi một phản ứng nhất định xảy ra.
Một ví dụ là môi trường dinh dưỡng chẩn đoán phân biệt "Endo". Nó được sử dụng để chọn các khuẩn lạc vi khuẩn có thể phân hủy đường lactose. Ban đầu, môi trường này có màu hơi hồng. Nếu một đàn vi sinh vật không thể phân hủy lactose, nó sẽ có màu trắng thông thường. Nếu vi khuẩn có thể phá vỡ chất nền này, chúng sẽ chuyển thành màu đỏ tươi đặc trưng.
Thứ Tư Tự chọn
Phòng thí nghiệm chẩn đoán thường làm việc với các miếng gạc có chứa nhiều loại vi khuẩn khác nhau. Rõ ràng, để công việc có chất lượng, bằng cách nào đó cần phải chọn ra các thuộc địa mà chúng ta cần từ hàng chục người bên ngoài. Đây là nơi mà môi trường phát triển vi khuẩn có thể trợ giúp, được tạo ra theo công thức lý tưởng để chỉ hỗ trợ một loại vi sinh vật.
Ví dụ,một môi trường tự chọn như vậy chỉ thích hợp cho sự sinh sản của Escherichia coli. Sau đó, từ việc gieo nhiều vi khuẩn trên đĩa Petri, chúng ta sẽ chỉ thấy các khuẩn lạc của cùng một Escherichia coli và không còn nữa. Trước khi bắt đầu công việc, cần phải biết rõ về sự trao đổi chất của vi khuẩn được nghiên cứu để chọn thành công nó từ hỗn hợp của các loài khác.
Môi trường nuôi cấy rắn, bán rắn và lỏng
Vi khuẩn không chỉ có thể phát triển trên nền rắn. Môi trường dinh dưỡng khác nhau ở trạng thái tập hợp của chúng, điều này phụ thuộc vào thành phần trong quá trình sản xuất. Ban đầu, tất cả chúng đều có độ sệt lỏng và khi gelatin hoặc thạch được thêm vào theo một tỷ lệ nhất định, hỗn hợp sẽ đông đặc lại.
Môi trường nuôi cấy lỏng thường được tìm thấy trong các ống nghiệm. Nếu cần thiết phải nuôi cấy vi khuẩn trong những điều kiện như vậy, hãy thêm dung dịch vào mẫu nuôi cấy và đợi 2-3 ngày. Kết quả có thể khác nhau: hình thành kết tủa, xuất hiện màng, các bông cặn nhỏ nổi lên hoặc tạo thành dung dịch vẩn đục.
Môi trường nuôi cấy đặc thường được sử dụng trong nghiên cứu vi sinh vật để nghiên cứu các đặc tính của khuẩn lạc vi khuẩn. Môi trường như vậy luôn trong suốt hoặc trong mờ để có thể xác định chính xác màu sắc và hình dạng của quá trình nuôi cấy vi sinh vật.
Chuẩn bị phương tiện
Chất nền như hỗn hợp thịt-peptone dựa trên nước dùng, gelatin hoặc thạch rất dễ chế biến. Nếu bạn cần tạo chất nền rắn hoặc nửa lỏng, thành chất lỏngthêm 2-3% hoặc 0, 2-0, 3% gelatin hoặc agar, tương ứng. Chúng đóng một vai trò chính trong việc làm cứng hỗn hợp, nhưng chúng không phải là nguồn cung cấp chất dinh dưỡng. Do đó, thu được môi trường dinh dưỡng phù hợp cho sự phát triển của vi khuẩn.
