Sự đa dạng của các bệnh nhiễm trùng do vi khuẩn đòi hỏi phải xác định rõ ràng tác nhân gây bệnh và định nghĩa loài của nó. Để xác định loại vi sinh vật, các nhà vi sinh vật học được trợ giúp bởi tính chất tin học của nó - tính nhạy cảm của vi sinh vật với việc nhuộm bằng các loại thuốc nhuộm khác nhau. Phương pháp này cho phép bạn khám phá hình thái của mầm bệnh. Các đặc tính tin học của vi khuẩn có tầm quan trọng lớn đối với nghiên cứu thực tế và lý thuyết trong lĩnh vực vi sinh vật học.
Nghiên cứu vi sinh vật
Trong vi khuẩn học, có nhiều phương pháp nhuộm vi sinh vật. Tất cả chúng đều dựa trên các đặc tính của vi khuẩn. Việc nhuộm màu cho phép bạn xác định hình dạng, cấu trúc, kích thước, vị trí tương đối của chúng. Điều này cho phép giải quyết các vấn đề về hệ thống hóa các loại vi sinh vật của sinh học đại cương và vi sinh vật học so sánh.
Tại sao lại sơn chúng
Vi khuẩn là thực tếcác sinh vật trong suốt và không sử dụng chất nhuộm màu, chúng có thể nhìn thấy rất kém đối với kính hiển vi thông thường. Bạn có thể sử dụng các loại kính hiển vi đặc biệt (tương phản pha, trường tối) để nghiên cứu vật thể, nhưng cách dễ nhất là nhuộm màu, sau đó vi khuẩn có thể nhìn thấy trong kính hiển vi ánh sáng thông thường.
Chuẩn bị mẫu
Bất kể kỹ thuật nhuộm được sử dụng là gì, vẫn có những quy tắc thống nhất để chuẩn bị đối tượng được nghiên cứu. Các giai đoạn sau là bắt buộc:
- Dụng cụ vô trùng tạo vết bẩn trên lam kính.
- Mẫu đang được sấy khô. Điều này được thực hiện ở nhiệt độ phòng hoặc sử dụng tủ sấy.
- Tiếp theo là giai đoạn cố định - các vi sinh vật được gắn vào kính bằng các hợp chất đặc biệt.
- Nhuộm thích hợp - mẫu được phủ bằng thuốc nhuộm trong một khoảng thời gian cố định, sau đó được rửa sạch.
- Sấy lần cuối - mẫu được làm khô lại.
Thuốc nhuộm phổ biến nhất
Thuốc nhuộm được sử dụng phổ biến nhất dựa trên anilin với các giá trị axit (pH) khác nhau. Hầu hết thuốc nhuộm là bột được pha loãng trong cồn.
Thuốc nhuộm trong đó cation là chất tạo màu được gọi là bazơ (pH lớn hơn 7). Chúng có thể được sử dụng để nhuộm vi sinh vật có màu đỏ (đỏ tươi, safranin), tím (tím metyl, thionine), xanh lam (xanh metylen), xanh lục (xanh malachit), nâu (chrysoidin) và đen (indulin).
Thuốc nhuộm, trong đó chất tạo màu là anion, được gọi là có tính axit (pH nhỏ hơn 7). Chúng sẽ nhuộm mẫu thành màu đỏ (eosin), vàng (picrin) hoặc đen (nigrosin).
Có một nhóm thuốc nhuộm trung tính (ví dụ, rhodamine B), trong đó cả cation và anion đều đóng vai trò là chất tạo màu.
Văn hóa sống chết
Phương pháp nhuộm được chia thành hai nhóm tùy theo dạng sống của mẫu thử.
- Vital (suốt đời). Phương pháp nghiên cứu các đặc tính của vi sinh vật này được sử dụng trong nghiên cứu các mô sống, giúp quan sát các quá trình sống của vi sinh vật. Đối với cách nhuộm này, thuốc nhuộm có độc tính thấp và khả năng xuyên thấu cao được sử dụng.
- Nhuộm sau quan trọng. Đây là sự nhuộm màu của các vi sinh vật đã chết hoặc bị giết. Nhờ các đặc tính của vi khuẩn, các nhà vi sinh học xác định được cấu trúc của chúng. Đây là cách nhuộm được sử dụng rộng rãi nhất.
Gram dương và Gram âm
Chính những đặc điểm này của vi khuẩn có thể được tìm thấy trong hướng dẫn của các loại thuốc khác nhau. Phương pháp nghiên cứu các đặc tính của vi khuẩn này dựa trên việc sử dụng thuốc nhuộm tím gentian và cố định iốt. Đây là kỹ thuật của Hans Christian Gram, một bác sĩ người Đan Mạch, người đã đề xuất nó vào năm 1884. Kết quả của quá trình nhuộm màu này, vi khuẩn được chia thành hai nhóm:
- Gram (+) - chuyển sang màu xanh lam(tụ cầu và liên cầu).
- Gram (-) - nhuộm màu hồng đến đỏ (vi khuẩn đường ruột, salmonella, E. coli).
Kết quả nhuộm khác nhau là do các đặc tính khác nhau của vách vi khuẩn. Phương pháp nhuộm Gram vẫn là phương pháp chính trong chẩn đoán một số bệnh truyền nhiễm.
Kỹ thuật nhuộm khác
Hãy mô tả một số phương pháp khác được sử dụng rộng rãi trong vi khuẩn học.
Phương pháp
Bào tử có thể được nhìn thấy
Phương pháp nhuộm màu fuchcin củaTsiel cho phép bạn nhìn thấy các bào tử vi khuẩn. Có màu hồng sau khi nhuộm, chúng nổi rõ trên nền vi khuẩn màu xanh lam. Phương pháp này cũng là một công cụ của vi khuẩn học và có tầm quan trọng thực tế rất lớn.
